| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1280417C |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2006.10.18 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200410088717.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 2004.11.01 |
| 專利名稱 | 一種人酪氨酸酶表達(dá)載體及其應(yīng)用 |
| 主分類號(hào) | C12N15/63(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N15/63(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)I;C12N15/81(2006.01)I;C12N9/00(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 清華大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 陳國(guó)強(qiáng);王宏濤;李振國(guó);吳 瓊 |
| 地址 | 100084北京市海淀區(qū)清華園 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 關(guān) 暢 |
| 國(guó)省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種人酪氨酸酶表達(dá)載體，是轉(zhuǎn)化了人酪氨酸酶基因和具有序列表中序列1核苷酸序列的His-tag基因的巴斯德畢赤酵母表達(dá)載體；所述巴斯德畢赤酵母表達(dá)載體為pPIC3.5K、pPIC3、pPIC9、pHIL-D1、pA0804、pA0815、pPSC3K或pPIC9K。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開(kāi)了一種人酪氨酸酶表達(dá)載體及其應(yīng)用，其目的是提供一種人酪氨酸酶表達(dá)載體及導(dǎo)入該載體的重組巴斯德畢赤酵母細(xì)胞和利用該重組細(xì)胞生產(chǎn)人酪氨酸酶的方法。該人酪氨酸酶表達(dá)載體是含有人酪氨酸酶基因和His-tag基因的巴斯德畢赤酵母表達(dá)載體。表達(dá)人酪氨酸酶的方法，包括培養(yǎng)重組巴斯德畢赤酵母細(xì)胞，甲醇誘導(dǎo)表達(dá)人酪氨酸酶及利用金屬親和層析分離純化人酪氨酸酶的步驟。本發(fā)明的人酪氨酸酶基因表達(dá)載體通過(guò)同源重組使人酪氨酸酶基因整合入巴斯德畢赤酵母細(xì)胞的基因組中，穩(wěn)定表達(dá)人酪氨酸酶，而且在發(fā)酵過(guò)程中無(wú)需使用昂貴的抗生素和IPTG，使生產(chǎn)成本大大降低，此外，巴斯德畢赤酵母的高密度生長(zhǎng)，也有利于人酪氨酸酶的表達(dá)，表達(dá)量可達(dá)0.39g/L。 |
| 國(guó)際公布 |
