| 公開(公告)號(hào) | CN1978632A |
| 公開(公告)日 | 2007.06.13 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200610123677.X |
| 申請(qǐng)日期 | 2006.11.21 |
| 專利名稱 | 重組畢赤酵母及其表達(dá)NGAL蛋白的方法 |
| 主分類號(hào) | C12N1/19(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N1/19(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)N;C12R1/84(2006.01)N |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 李恩民;張丕顯;吳炳禮;杜則澎;許麗艷 |
| 地址 | 515031廣東省汕頭市新陵路22號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 廣州粵高專利代理有限公司 |
| 代理人 | 陳 衛(wèi) |
| 國省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種重組畢赤酵母，其特征在于由如下方法制備而成： (1)PCR擴(kuò)增NGAL的cDNA； (2)PCR產(chǎn)物與載體pPIC9連接，構(gòu)建重組質(zhì)粒pPIC9-NGAL； (3)重組質(zhì)粒pPIC9-NGAL轉(zhuǎn)化畢赤酵母，得到重組畢赤酵母。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及NGAL蛋白，公開了重組畢赤酵母及其表達(dá)NGAL蛋白的方法。本發(fā)明通過PCR擴(kuò)增、連接、轉(zhuǎn)化與篩選，最終獲得高效表達(dá)NGAL蛋白的重組畢赤酵母菌株。該菌株能將目標(biāo)蛋白分泌到培養(yǎng)基中，可達(dá)＞100mg/L，而且無雜蛋白。這使得接續(xù)下來的純化工藝變得十分簡(jiǎn)單：發(fā)酵液經(jīng)硫酸銨沉淀、脫鹽、陽離子交換層析即可。所得蛋白優(yōu)于原核表達(dá)蛋白，糖基化完整，可用于人NGAL功能研究以及臨床NGAL檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)蛋白。 |
| 國際公布 |
