公開(公告)號
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CN1323081C
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公開(公告)日
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2007.06.27
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申請(專利)號
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CN200510013115.5
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申請日期
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2005.01.19
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專利名稱
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二步樹脂法制備河豚毒素的方法及河豚毒素制劑
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主分類號
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C07D491/22(2006.01)I
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分類號
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C07D491/22(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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南開大學(xué);天津南大日月生物科技有限公司
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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陳家童;蘇同芳;梁同春;孫存禎;林平生;賀秉軍;王同順
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地址
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300071天津市南開區(qū)衛(wèi)津路94號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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天津佳盟知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
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代理人
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侯 力
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國省代碼
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天津;12
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主權(quán)項(xiàng)
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一種二步樹脂法制備河豚毒素的方法,其特征是該方法包括下述步驟:1)將河豚魚內(nèi)臟破碎,加去離子水進(jìn)行攪拌提取,提取是在雙層提取罐夾層以冷卻水進(jìn)行循環(huán)冷卻,溫度保持在2-8℃中進(jìn)行,得提取混合液,將其加熱以凝固蛋白、吊濾去除固形物,獲得微黃色初毒液;2)初毒液經(jīng)非極性吸附樹脂樹脂攪拌吸附,攪拌速度10-30轉(zhuǎn)/分鐘,吸附5小時(shí);吸附完畢后,濾出樹脂,獲無雜質(zhì)粗毒液;3)將粗毒液上樹脂柱,經(jīng)離子交換型樹脂樹脂吸附,吸附完畢經(jīng)水洗后,用洗脫液醋酸∶水pH=3.5進(jìn)行洗脫;收集高濃餾份,獲得的液體,即河豚毒素粗品;4)將所得的液體河豚毒素粗品進(jìn)行低溫減壓濃縮,溫度小于50℃,減壓真空度0.8-1.1Pa,濃縮至小體積,得高濃度河豚毒素液;5)調(diào)節(jié)所得高濃度河豚毒素液pH=7.5-9.0,使達(dá)到等電點(diǎn),置低溫條件下靜置獲得河豚毒素結(jié)晶;6)將所得河豚毒素結(jié)晶用鹽酸、或醋酸、或者苦味酸作試劑溶解,并再用堿性試劑調(diào)pH=7.5-9.0,達(dá)到等電點(diǎn),將產(chǎn)品再次結(jié)晶純化,獲得的結(jié)晶產(chǎn)品經(jīng)干燥后,即為所需的河豚毒素產(chǎn)品。
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摘要
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本發(fā)明公開了一種工廠規(guī);a(chǎn)河豚毒素的制備方法。原料為河豚魚內(nèi)臟,采用一種提取罐提取、二步樹脂法純化和二次結(jié)晶生產(chǎn)工藝,得以使河豚毒素產(chǎn)品達(dá)到工廠規(guī)模化生產(chǎn)。生產(chǎn)過程中操作安全、簡便,獲得的產(chǎn)品質(zhì)量高,產(chǎn)品收率高,產(chǎn)品純度達(dá)到96%-99%。符合作為醫(yī)學(xué)臨床應(yīng)用和生物試劑應(yīng)用所需的品質(zhì)質(zhì)量。二步樹脂法生產(chǎn)河豚毒素的制備方法,適用河豚毒素產(chǎn)品的批量生產(chǎn)。其產(chǎn)品可作為臨床戒斷生物堿類成癮性依賴藥物綜合癥(戒毒)用藥,以及可作為鎮(zhèn)痛用藥替代嗎啡、度冷丁等。還可作為解痙、鎮(zhèn)靜、局部麻醉、抗瘙癢、及心動過速和降血壓等臨床用藥。同時(shí)也可作為離子通道阻斷作用研究的生物試劑。
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國際公布
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