六味木香散－胡椒堿的測定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測定六味木香散中胡椒堿的含量。

本方法適用于六味木香散中胡椒堿含量的測定。

供試品置棕色具塞瓶中，加氯仿及濃氨試液搖勻，避光放置過夜，補足減失的溶劑量，濾過，取續(xù)濾液水浴上蒸干，殘渣用無水乙醇溶解，制成供試液，點樣、展開，用薄層掃描儀進行掃描，于波長：λs=335nm， λ_R=215nm測量胡椒堿（C₁₇H₁₉NO₃)吸收度積分值，計算其含量。

1 氯仿

2 氨水

3 無水乙醇

4 苯

5 醋酸乙酯

6 無水甲醇

1 儀器

1.1水浴鍋

1.2薄層掃描儀

1.3涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點樣器

一般采用微升毛細管或與之相應(yīng)的點樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1.對照品溶液的制備

精密稱取胡椒堿對照品適量，置棕色量瓶中，加無水乙醇制成每 1mL含 0.5mg的溶液，作為對照品溶液。

2.供試品溶液的制備

精密稱取供試品粉末約 2.5g，置棕色具塞瓶中，分別精密加氯仿25mL、濃氨試液1mL，搖勻，稱定重量，避光放置過夜，再稱定重量，補足減失的溶劑量，濾過。精密量取續(xù)濾液5mL，60℃水浴上蒸干，殘渣用無水乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至 5mL棕色量瓶內(nèi)，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2點樣

精密吸取供試品溶液 6μL、對照品溶液 2μL與 4μL，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，如用點樣器點樣到薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大于2mm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

3展開

將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以苯－醋酸乙酯－無水甲醇（8：2：0.5)為展開劑，展開，取出，晾干。

4含量測定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進行掃描，波長：λs=335nm， λ_R=215nm， 測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。

用外標法測定時，若對照品各數(shù)據(jù)點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜采用二點法校正，必要時用多點法校正。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編、化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部p.401。