方法名稱:
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方法名稱: |
六味木香散-胡椒堿的測(cè)定-薄層掃描法 |
應(yīng)用范圍: |
本方法采用薄層掃描法測(cè)定六味木香散中胡椒堿的含量。 本方法適用于六味木香散中胡椒堿含量的測(cè)定。 |
方法原理: |
供試品置棕色具塞瓶中,加氯仿及濃氨試液搖勻,避光放置過夜,補(bǔ)足減失的溶劑量,濾過,取續(xù)濾液水浴上蒸干,殘?jiān)脽o水乙醇溶解,制成供試液,點(diǎn)樣、展開,用薄層掃描儀進(jìn)行掃描,于波長(zhǎng):λs=335nm, λR=215nm測(cè)量胡椒堿(C17H19NO3)吸收度積分值,計(jì)算其含量。 |
試劑: |
1 氯仿 2 氨水 3 無水乙醇 4 苯 5 醋酸乙酯 6 無水甲醇 |
儀器設(shè)備: |
1 儀器 1.1水浴鍋 1.2薄層掃描儀 1.3涂布器 應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動(dòng)涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。 1.4點(diǎn)樣器 一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。 1.5展開室 可用適合薄層板大小的專用玻璃缸,底部平底或雙槽,蓋子須密閉。 2 材料 2.1玻板 用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格,要求光滑、平整,洗凈后不附水珠,晾干。 2.2吸附劑 硅膠G,其顆粒大小一般要求直徑為10~40μm。 |
試樣制備: |
1.對(duì)照品溶液的制備 精密稱取胡椒堿對(duì)照品適量,置棕色量瓶中,加無水乙醇制成每 1mL含 0.5mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。 2.供試品溶液的制備 精密稱取供試品粉末約 2.5g,置棕色具塞瓶中,分別精密加氯仿25mL、濃氨試液1mL,搖勻,稱定重量,避光放置過夜,再稱定重量,補(bǔ)足減失的溶劑量,濾過。精密量取續(xù)濾液5mL,60℃水浴上蒸干,殘?jiān)脽o水乙醇溶解,轉(zhuǎn)移至 5mL棕色量瓶?jī)?nèi),并稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。 注:“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一!熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟: |
1薄層板制備 將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合,去除表面的氣泡后,倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布(厚度為0.25~0.5mm)取下涂好薄層的玻板,于室溫下,置水平臺(tái)上晾干,在反射光及透射光下檢視,表面應(yīng)均勻,平整,無麻點(diǎn)、無氣泡、無破損及污染,于110℃烘30分鐘,冷卻后立即使用或置干燥箱中備用,或用商品預(yù)制板。 2點(diǎn)樣 精密吸取供試品溶液 6μL、對(duì)照品溶液 2μL與 4μL,分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上,一般為圓點(diǎn),點(diǎn)樣基線距底邊1.0~1.5cm,樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm,點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。 3展開 將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,以苯-醋酸乙酯-無水甲醇(8:2:0.5)為展開劑,展開,取出,晾干。 4含量測(cè)定 在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板,周圍用膠布固定,選擇反射方式,采用吸收法,進(jìn)行掃描,波長(zhǎng):λs=335nm, λR=215nm, 測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值,計(jì)算。 用外標(biāo)法測(cè)定時(shí),若對(duì)照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線上呈一通過原點(diǎn)的直線時(shí),可用一點(diǎn)法校正,如不通過原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正,必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。 |
參考文獻(xiàn): |
中華人民共和國(guó)藥典,國(guó)家藥典委員會(huì)編、化學(xué)工業(yè)出版社,2005年版,一部p.401。 |