山楂化滯丸－熊果酸的測定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測定山楂化滯丸中熊果酸的含量。

本方法適用于中成藥山楂化滯丸。

供試品于索氏提取器中經(jīng)乙醚加熱回流，過濾，濾液蒸干，殘渣用無水乙醇－氯仿（3：2)混合液溶解，制成供試液，點樣、展開，以10%硫酸乙醇溶液顯色，用薄層掃描儀進行掃描，于波長λs=535nm， λ_R=650nm測量熊果酸（C₃₀H₄₈O₃)吸收度積分值，計算其含量。

1 乙醚

2 石油醚

3 無水乙醇

4 氯仿

5 環(huán)己烷

6 醋酸乙酯

7 甲酸

8 硫酸 10%硫酸乙醇溶液

9 乙醇

1 儀器

1.1索氏提取器

1.2薄層掃描儀

1.3涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點樣器

一般采用微升毛細管或與之相應(yīng)的點樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1.對照品溶液的制備

精密稱取熊果酸對照品適量，加無水乙醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。

2.供試品溶液的制備

取供試品，剪碎，精密稱取約3g，，加水10mL，放置使溶散，濾過；藥渣再用水10mL洗滌，在室溫干燥至呈松軟的粉末狀，在100℃烘干，連同濾紙一并置索氏提取器內(nèi)，加乙醚適量，加熱回流提取4小時，提取液回收乙醚至干，殘渣用石油醚（30～60℃)浸泡2次，每次5mL（浸泡2分鐘)，傾去石油醚，殘渣加適量無水乙醇－氯仿（3：2)混合液，微熱使溶解，轉(zhuǎn)移至5mL量瓶內(nèi)，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2.點樣

精密吸取供試品溶液 6μL、對照品溶液 4μL與 8μL，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，如用點樣器點樣到薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大于2mm，點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

3.展開

將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以環(huán)己烷－氯仿－醋酸乙酯－甲酸（20：5：8：0.1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加熱5～7分鐘，至斑點顯色清晰，取出。

4.含量測定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進行掃描，波長：λs=535nm， λ_R=650nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。

用外標(biāo)法測定時，若對照品各數(shù)據(jù)點在校正曲線上呈一通過原點的直線時，可用一點法校正，如不通過原點通常宜采用二點法校正，必要時用多點法校正。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編、化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部p.336。