銀杏葉提取物－總黃酮醇苷的測(cè)定－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定銀杏葉提取物中總黃酮醇苷的含量。

本方法適用于銀杏葉經(jīng)加工制成的提取物。

本品加甲醇-25%鹽酸溶液（4：1)加熱回流，冷卻，用甲醇稀釋，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)360nm處檢測(cè)槲皮素的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇

2. 25%鹽酸溶液

3. 0.4%磷酸溶液

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇 0.4%磷酸溶液＝50 50

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：360nm

2.3柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱定本品35mg，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

分別精密稱取槲皮素對(duì)照品、山奈素對(duì)照品、異鼠李素對(duì)照品，加甲醇制成每1mL分別含30mg、30mg、20mg的混合溶液；或精密稱取已標(biāo)示槲皮素、山奈素、異鼠李素含量的銀杏葉對(duì)照提取物35mg，照供試品溶液的制備方法，同法制成對(duì)照提取物溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品約35mg，精密稱定，加甲醇-25%鹽酸溶液（4：1)的混合溶液25mL，置水浴中加熱回流30分鐘，迅速冷卻至室溫，轉(zhuǎn)移至50 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，續(xù)濾液作為供試品溶液。

分別精密吸取對(duì)照品溶液（或?qū)φ仗崛∥锶芤?和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)360nm處測(cè)定槲皮素、山奈素和異鼠李素的峰面積，計(jì)算出其含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p281。