方法名稱(chēng)： |
三妙丸－掌葉防己堿含量的測(cè)定－高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用HPLC法測(cè)定三妙丸中小檗堿的含量。 |
方法原理： |
將原藥中的有效成分提取后，所得溶液采用毛細(xì)管GC法進(jìn)行測(cè)定，所得圖譜與對(duì)照品圖譜進(jìn)行對(duì)比分析，記錄其響應(yīng)值，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法計(jì)算三妙丸中掌葉防己堿的含量。 |
試劑： |
1. 甲醇（分析純) 2. 鹽酸掌葉防己堿對(duì)照品（中國(guó)藥科大學(xué)) |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀－Waters510泵（Waters公司) Nova－PakC18柱（4μm，3.9mm×15mm) 1.2 Waters U6K進(jìn)樣器 1.3 Shimadzu Libror AEL－40SM精密（十萬(wàn)分之一)天平 2色譜條件 2.1流動(dòng)相：乙腈－水＝1：1（1000mL含磷酸二氫鉀3.4g及十二烷基硫酸鈉1.7g) 2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：345nm 2.3柱溫：室溫 2.4 流量：0.9mL/min |
試樣制備： |
1 供試品的制備 取成藥適量，精密稱(chēng)重，置10mL具塞離心管內(nèi)，加5mL甲醇超聲提取15min，離心（3000r/min)5min，傾取上清液，過(guò)濾。重復(fù)操作3次，合并濾液，濾紙及殘?jiān)眉状记逑�，過(guò)濾，并入上清液，定容至25mL，用微孔濾膜過(guò)濾，棄去初濾液，取續(xù)濾液作為供試品溶液，待用。 2 對(duì)照品溶液的配制 精密稱(chēng)取鹽酸掌葉防己堿對(duì)照品10.45mg，用甲醇定容至100mL，作為儲(chǔ)備液。精密量取上述儲(chǔ)備液1mL，甲醇定容至25mL，作為對(duì)照品溶液待用。 注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制 精密吸取對(duì)照品溶液1、2、5、6、10、18、30、40μL進(jìn)樣，按前述色譜條件測(cè)定峰面積，以進(jìn)樣量X（μg)為橫坐標(biāo)、峰面積Y為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 精密吸取上述供試品溶液5μL注入高效液相色譜儀，按前述色譜條件測(cè)定峰面積，用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法計(jì)算樣品中掌葉防己堿含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
潘楊,王天山，馬國(guó)祥等. HPLC法測(cè)定成藥二妙丸、三妙丸、四妙丸及知柏地黃丸中小檗堿、掌葉防己堿和藥根堿的含量.中草藥，1997，（3)：142-144. |
