雙黃連顆粒-黃芩苷測定-連翹苷的測定-高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定雙黃連顆粒中黃芩苷和連翹苷的含量。

本方法適用于中成藥雙黃連顆粒。

本方法采用高效液相色譜法測定雙黃連顆粒中黃芩苷和連翹苷的含量。

本方法適用于中成藥雙黃連顆粒。

1. 甲醇(色譜純)

2. 乙腈(色譜純)

3. 磷酸

4. 黃芩苷對照品(中國藥品生物制品檢定所)

5. 連翹苷對照品(中國藥品生物制品檢定所)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Create C₁₈柱(4.6mm×250mm，5μm)

1.3二極管陣列檢測器

1.4 全自動(dòng)進(jìn)樣器

1.5 色譜工作站

1.6超聲發(fā)生器

2 色譜條件

2.1流動(dòng)相：乙腈＋水＋磷酸＝100＋300＋1

2.2流速：1.0ml/min

2.3檢測波長：230nm

2.4柱溫：28℃

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密稱取黃芩苷、連翹苷對照品置于同一量瓶中，用甲醇配成0.01088mg/mL(黃芩苷)和0.0352mg/mL(連翹苷)的混合對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取雙黃連顆粒約1g研細(xì)，取0.1g精密稱定，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，超聲20min，放冷，定容，搖勻，用一次性針頭過濾器過濾，即得供試品溶液。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

取混合對照品溶液，進(jìn)樣1、3、5、7、9、11mL，以進(jìn)樣量(mg)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。回歸方程為：黃芩苷Y=1511046X-81061，r=0.99995，線性范圍(0.1088-1.1968) mg。連翹苷Y=519354X-11525，r=0.99991，線性范圍(0.0352-0.3872) mg。

2. 供試品的測定

精密吸取供試品溶液5μL注入高效液相色譜儀測定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算黃芩苷和連翹苷的含量。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

白奎福，王英，趙丹江，HPLC法共同測定雙黃連顆粒中黃芩苷和連翹苷含量，中醫(yī)藥學(xué)報(bào)，2004，32(2)：13～14