葛根芩連微丸－葛根素的測定－薄層掃描法

本方法采用薄層掃描法測定葛根芩連微丸中葛根素的含量。

本方法適用于中成藥葛根芩連微丸。

1. 甲醇

2. 氯仿

3. 無水乙醇

1 儀器

1.1 電子天平

1.2 薄層掃描儀

1.3 涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點樣器材。

1.5展開室

適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2材料

2.1玻板

要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1. 供試品的稱量

精密稱取本品(通過四號篩-65目)約0.54g，60℃干燥l h

2. 對照品溶液的制備

精密稱取葛根素對照品適量，加乙醇制成lmL含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

將供試品置具塞三角瓶中，加無水乙醇25mL，超聲15min，濾過，無水乙醇洗滌濾渣和容器2次，每次10mL，合并濾液、洗液，回收乙醇，蒸至約5mL，加于已處理好的中性氧化鋁柱(內(nèi)徑9mm，100-200目，5g，無水乙醇濕法裝柱)上，先用無水乙醇20mL洗脫，后改用70％乙醇50mL洗脫，收集70％乙醇洗脫液，蒸干，殘渣用乙醇分次溶解，定量移入10mL量瓶中，加乙醇至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

1.薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2.點樣

精密吸取供試品溶液2μL、對照品溶液2μL與4μL，分別交叉點于同一硅膠G薄層板上，如用點樣器點樣到薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點直徑一般不大于2mm，點間距離可視斑點擴散情況，以不影響檢出為宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。

3.展開

將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以氯仿－甲醇－水（60:35:10)10℃以下放置12小時的下層溶液為展開劑，展開至8～15cm時，取出薄層板，晾干，在365nm紫外燈下檢視。

4.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別精密吸取1、2、3、4、5μL按以上色譜條件點于薄層板上，展開，掃描，以吸收峰面積與對照品點樣量繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

5.含量測定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，用雙波長進(jìn)行掃描，波長：λ_S =256nm，λ_R=360nm，測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計算。

夏宏. 葛根芩連微丸中葛根素的含量測定. 中國醫(yī)院藥學(xué)雜志，2002，22（11)：681-682.