氯霉素眼膏—氯霉素的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定氯霉素眼膏中氯霉素 (C₁₁H₁₂ Cl₂N₂O₅)的含量。

本方法適用于氯霉素眼膏中氯霉素的含量測(cè)定。

取本品適量，加石油醚溶解，用磷酸緩沖液（pH6.0)提取后，取適量用流動(dòng)相定量稀釋制成每1mL中約含氯霉素0.10mg的溶液，注入液相色譜儀，在272nm波長(zhǎng)處檢測(cè)，記錄色譜圖。另取氯霉素對(duì)照品適量，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

1. 甲醇

2. 0.1%庚烷磺酸鈉溶液

取0.1%庚烷磺酸鈉溶液500mL二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混勻。

3. 二甲基甲酰胺

4. 冰醋酸

5. 石油醚

6. 磷酸緩沖液（pH6.0)

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按氯霉素峰計(jì)算不低于2500。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2. 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：0.1%庚烷磺酸鈉溶液＋乙腈=75 25

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：272nm

2.3 柱溫：室溫

取0.1%庚烷磺酸鈉溶液500mL二甲基甲酰胺5mL、冰醋酸0.5mL，混勻。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取氯霉素對(duì)照品適量，按氯霉素每10mg加甲醇1mL使溶解后，用流動(dòng)相定量稀釋制成每1mL中約含氯霉素0.10mg的溶液，搖勻，即為對(duì)照品溶液。

3.供試品溶液的制備

取本品約2g，精密稱定，置分液漏斗中，加石油醚30mL，振搖，使基質(zhì)溶解，加磷酸緩沖液（pH6.0)提取3次，每次20mL，合并提取液，置100mL量瓶中，加磷酸緩沖液（pH6.0)稀釋至刻度，搖勻，精密稱取適量，用流動(dòng)相定量稀釋成每1mL中約含0.10mg的溶液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

分別精密量取供試品及對(duì)照品溶液10μL注入液相色譜儀，在272nm波長(zhǎng)處檢測(cè)，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.777。