復方呋塞米片—呋塞米與鹽酸阿米洛利的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定復方呋塞米片中呋塞米與鹽酸阿米洛利的含量。

本方法適用于復方呋塞米片。

供試品經(jīng)超聲提取后，制成流動相溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長286nm處檢測呋塞米與鹽酸阿米洛利的吸收值，計算出其含量。

1. 甲醇

2. 磷酸緩沖液

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按呋塞米峰計算不低于2000。呋塞米峰與鹽酸阿米洛利峰的分離度應符合要求。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：水 甲醇 磷酸緩沖液=50 49 1

2.2 檢測波長：286nm

2.3 柱溫：室溫

1. 磷酸緩沖液

取磷酸二氫鉀13.6g，加水80mL，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0，用水稀釋至100mL。

2. 稱取供試品

取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取約適量（約相當于呋塞米40mg與鹽酸阿米洛利5mg)。

3. 對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸阿米洛利對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋成每1mL約含1 mg的溶液，作為對照品溶液（1)。

精密稱取呋塞米對照品40mg，置200mL量瓶中，加甲醇15mL與0.1mol/L鹽酸溶液2mL，超聲處理15分鐘，放冷，在精密加入對照品溶液（1)5mL，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

4. 供試品溶液的制備

將上述供試品置于200mL量瓶中，加甲醇15mL和0.1mol/L鹽酸溶液2mL，超聲處理15分鐘，放冷，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL 注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長286nm處測定呋塞米與鹽酸阿米洛利的吸收值，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.427。