三 原始圖像的獲取
任何修改工作都是在原始圖像的基礎(chǔ)上進(jìn)行,如果原始圖像質(zhì)量不佳,那必將事倍功半。下面對有利于原始圖像質(zhì)量的細(xì)節(jié)略做介紹。因?yàn)椴煌瑏碓吹膱D像,其注意點(diǎn)也不一樣,因此分開。
1)來自照相的 獲得的數(shù)碼文件多是在顯微鏡視野下采集的,因此聚焦和暴光是必須要考慮的。顯微鏡下景深極淺,意味著聚焦清晰不能依賴于小光圈,而應(yīng)靠精細(xì)調(diào)節(jié)顯微鏡。注意應(yīng)使照相通道和目鏡觀察通道相一致,即目鏡下最清晰時(shí)也是拍照最清晰的,以方便拍照。拍照時(shí)相機(jī)應(yīng)選擇最大光圈,廣角端。不要使用望遠(yuǎn)變焦,它使得視野變小且放大倍數(shù)難以計(jì)算。聚焦不清的另一主要問題在于相機(jī)的抖動(dòng)。雖然一般相機(jī)都固定在顯微鏡上,但按快門時(shí)的手震有時(shí)仍不可忽視,這時(shí)一個(gè)簡單的辦法是利用相機(jī)的自拍功能,按下快門之后經(jīng)倒數(shù)計(jì)時(shí)后正式拍攝。一般明視野下,利用相機(jī)的自動(dòng)暴光都能達(dá)到要求;暗視野下有時(shí)需要高達(dá)幾分鐘的暴光時(shí)間,這是一般數(shù)碼相機(jī)達(dá)不到的,只能通過專業(yè)的CCD系統(tǒng)并用軟件幫助采集圖像。一些軟件可以用來修改暴光不足的照片,但暴光過度往往使圖像細(xì)節(jié)丟失。顯微鏡下拍攝時(shí)閃光燈不起作用,將它關(guān)閉。通過白平衡,一般不會產(chǎn)生嚴(yán)重的偏色。另外,由于鏡頭的原因,邊角處難免會有失真,因此,請保證目標(biāo)在視野正中,鏡頭成像最佳范圍內(nèi),而無須鋪滿整個(gè)視野,現(xiàn)在的數(shù)碼相機(jī)的像素值已經(jīng)足夠高了。
2)來自采樣軟件的 采樣軟件所采得的原始圖形一般儲存在特定格式的文件中,通過該軟件或配套的分析軟件打開。有的采樣或分析軟件可以將圖形直接輸出到word或Photoshop中,但有的則不能。這時(shí)最簡單的辦法就是通過抓屏或抓圖軟件來獲取。通過采樣軟件獲取的圖形輸出后僅做些切割、拼合的工作,不應(yīng)該做更多其它的修改。圖形在采樣軟件中可以通過改變x; y軸的縮放比改變形狀,因此一組圖片應(yīng)該選擇統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),并且標(biāo)注x, y標(biāo)尺。圖形的精細(xì)程度和采樣頻率相關(guān),采樣頻率越高,圖片越精細(xì)。圖片中不必要的顏色信息可以在Photoshop中丟棄,圖像/調(diào)整/去色醫(yī).學(xué).全.在.線zxtf.net.cn。
3)來自統(tǒng)計(jì)作圖軟件的 常用的統(tǒng)計(jì)作圖軟件包括origin、sigmaplot等,功能非常強(qiáng)大,但一般應(yīng)用excel也可滿足。這些軟件作的圖一般都可直接輸出到word及Photoshop中(如excel,選中圖片,右鍵復(fù)制,打開Photoshop,新建,自動(dòng)跳出匹配的畫布大小,編輯/粘貼 即可),所以修改圖片應(yīng)多在統(tǒng)計(jì)軟件中,輸出后不宜多做修改。圖中盡量不要用顏色或灰度來區(qū)別組間,而多利用形狀特征。如excel的柱狀圖,選擇 填充/圖案,里面有足夠多的選擇項(xiàng)。各統(tǒng)計(jì)作圖軟件功能強(qiáng)大,超出了本文敘述的范圍,就不多說了。