藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)和技術(shù)
一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捉拿、固定及給藥方法
1.小白鼠：右手抓住鼠尾，放在臺(tái)上或鼠籠蓋鐵絲網(wǎng)下，然后用左手拇指沿其背部向前抓住其頸部皮膚，并以左手的小指和掌部夾住其尾固定在手上。另一抓法是只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾尖，后用手掌及小指夾住其尾巴，再以拇指及食指捉住其頸部皮膚。前一方法易學(xué)，另一方法稍難，但便于快速捉拿給藥。
小鼠灌胃（ig)法：將小鼠固定后，右手持裝有灌胃器的注射器，自口角外插入口腔，沿上顎插入食道。如遇阻力，可將注射器拔出再插，以免穿破食道或誤入氣管，造成動(dòng)物死亡。灌胃容量一般為0.1—0.2ml/10g，不超過(guò)0.5ml/只。
小鼠皮下注射(sc)法：兩人合作，一人一手抓住小白鼠頭部皮膚，另一手抓住鼠尾。另一人注射藥物。注射部位在背部皮下組織。如一人操作時(shí)，左手抓鼠尾，讓鼠爬在鐵絲籠上，右手將抽好藥液的注射器針頭插入背部皮下組織。如一人操作時(shí)，左手抓鼠尾，讓鼠爬在鐵絲籠上，右手將抽好的藥液的注射器針頭插入背部皮下將藥注入。注射量不超過(guò)0.5ml/只。
小鼠腹腔注射(ip)法：左手持鼠，右手持注射器從下腹左或右側(cè)（避開膀胱)朝頭部方向刺入，宜先刺入皮下，經(jīng)2—3mm再刺入腹腔，此時(shí)針頭與腹壁的角度約45度。針尖插入不宜太深或太近上腹部，避免刺破內(nèi)臟，注射量一般為0.1—0.25ml/只。
小鼠尾靜脈注射法(iv)：將小鼠置于固定器內(nèi)，使其尾巴露出，用70%酒精擦尾部，或?qū)⑹笪步?0℃熱水中。待尾部靜脈擴(kuò)張后，左手拉尾，右手進(jìn)針。注射容量不超過(guò)0.5ml/只。
2.兔：用手抓起它脊背近后頸處皮膚，抓的面積越大其持重點(diǎn)越分散。如家兔肥大，應(yīng)再以另一手托住它的臀部，將持重點(diǎn)承托于手上。
將兔作仰臥位，一手仍抓住頸部皮膚，另一手順其腹部撫摸至膝關(guān)節(jié)，壓住關(guān)節(jié)。另一人用繩帶捆綁四肢，使兔腹部向上，固定在兔手術(shù)臺(tái)上。頭部則用兔頭固定夾固定。
兔灌胃法：二人合作，一人固定家兔于兩膝之間，一手固定兔頭，使頭部后仰，另一手將開口器插入兔口，并向后翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使兔舌伸直并壓在開口器下面。另一人將胃管從開口器中央孔也插入口內(nèi)緩慢插入食道和胃。插管時(shí)感覺順利，動(dòng)物不掙扎，也不屏氣，表示胃管在胃內(nèi)，為慎重起見，將胃管外端放入水中，當(dāng)兔呼氣時(shí)，未見氣泡出現(xiàn)，即證實(shí)胃管在胃內(nèi)，然后將藥液緩緩經(jīng)胃管注入。灌胃容量一般為10ml/kg。
兔耳靜脈注射法：兩人合作，一人固定兔身及兔頭，一人將兔耳后緣之毛拔去，顯露耳緣靜脈，用手指輕彈耳殼，使血管擴(kuò)張。助手左手指壓住耳緣靜脈根部，待血管明顯充血后，將抽好藥液的注射器從靜脈近耳尖處插入血管。針頭刺入血管以后，以左手拇指和食指將針頭與兔耳固定，不讓針頭滑動(dòng)。放開耳根靜脈手指壓力，即可注入藥液，若針頭確實(shí)在血管內(nèi)，則推藥通暢無(wú)阻力，并見血液被藥液沖走，如沆入皮下則耳殼腫脹、推注不順，需拔出重新注射。注射守畢，用手指按在針眼上，然后將針尖抽出，并繼續(xù)用手指或加棉球輕輕按壓2—3分鐘，以防出血，注射量0.5—2.5ml/kg。
3.大白鼠：以左手或持夾子抓住鼠尾，左手戴防護(hù)手套或用厚布蓋住鼠身作防護(hù)，握住其整個(gè)身體，并固定其頭骨，防止被咬傷，注意不要握力過(guò)大，勿捏其頸部以免窒息致死，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要可指定于大鼠固定籠內(nèi)或用繩綁其四肢，固定于大鼠手術(shù)臺(tái)上。
大白鼠灌胃、腹腔注射、靜脈注射均可一人操作，基本方法與小鼠相似。也可將大鼠腹股溝切開，從股靜脈注射藥物，也可從外頸靜脈插管給藥（麻醉后)。
二、藥理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則
重復(fù)：重復(fù)的醫(yī)學(xué)招聘網(wǎng)目的是看實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重現(xiàn)率，重現(xiàn)率越高，實(shí)驗(yàn)的可信性就越好。重現(xiàn)率在95%以上者，可認(rèn)為實(shí)驗(yàn)相當(dāng)可靠，兩藥平均值或效率的差別有顯著意義，并用“P（機(jī)率)<0.05”來(lái)表示，意即指：“不能重現(xiàn)的可能性小于5%”，如重現(xiàn)率在99%以上者可信為實(shí)驗(yàn)非�？煽浚勺龀觥安顒e有非常顯著意義”的結(jié)論并用“P<0.01”來(lái)表示；重現(xiàn)率小于95%者，說(shuō)明重復(fù)同樣實(shí)驗(yàn)100次，將有5次以上機(jī)會(huì)出現(xiàn)相反的結(jié)果，固此認(rèn)為兩藥的差別可能是個(gè)體差異而造成的，統(tǒng)計(jì)學(xué)上可做出“兩組差別并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義”的結(jié)論，并以P>0.05來(lái)表示。但這種結(jié)論并不意味著兩組無(wú)差別。一般可在檢查原因后，改進(jìn)實(shí)驗(yàn)條件，增加實(shí)驗(yàn)例數(shù)，還有可能提高實(shí)驗(yàn)的重現(xiàn)率，達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著意義的水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的實(shí)際價(jià)值，不但需從統(tǒng)計(jì)結(jié)論來(lái)看，還應(yīng)從專業(yè)角度來(lái)看。在統(tǒng)計(jì)學(xué)上都是達(dá)到P<0.05的水平，實(shí)驗(yàn)例數(shù)多者并不一定比例數(shù)少者更有價(jià)值。但為了作出正確的結(jié)論，根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中的重復(fù)原則，對(duì)各類動(dòng)物的重復(fù)數(shù)，可提出一個(gè)大體范圍，以供實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)參考。
2.對(duì)照：對(duì)照是比較的基礎(chǔ)，沒(méi)有比較就沒(méi)有鑒別，也就談不上科學(xué)性。對(duì)照應(yīng)符合“齊同可比”原則，除了所研究的因素（藥物)外，其他條件各組也應(yīng)一律“齊同”。如動(dòng)物的性別、年齡、體重。一般健康狀況等，也應(yīng)基本一致，只有這樣才能具備“可比性”。所以實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)必須設(shè)立對(duì)照組。對(duì)照組的類型有以下三種：
（1)陰性對(duì)照：包括①空白對(duì)照，即不給任何處理的正常動(dòng)物作對(duì)照，較少用。②假處理對(duì)照，即除不用被研究的藥物外，對(duì)照組的動(dòng)物重經(jīng)受同樣的處理，如麻醉、手術(shù)、注射不含藥物的溶媒等。這種對(duì)照的可比性好，較常用。
（2)陽(yáng)性對(duì)照：包括①標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，即以典型藥物劃標(biāo)準(zhǔn)品作為對(duì)照，以便評(píng)定藥物的作用強(qiáng)度。②弱陽(yáng)性對(duì)照，即以藥效較弱的老藥作為對(duì)照。如果新藥優(yōu)于老藥，并有顯著意義，則可肯定新藥的價(jià)值。
3．隨機(jī)：隨機(jī)就是使每一個(gè)體在實(shí)驗(yàn)中都有同等的機(jī)會(huì)，隨機(jī)遇而分組或接受處理。隨機(jī)可減少許多難以控制的干擾因素，消除偏差。
藥理實(shí)驗(yàn)常用符號(hào)
度量衡及劑量符號(hào)
L（l)，升 | dl， 分升（10-1L) |
ml，毫升（10-3L) | μl，， 微升（10-6L) |
kg，千克（公斤) | g， dq （10-3kg) |
mg，毫克（10-3g) | μg，， 微克（10-6g) |
ng，納克（10-9g) | pg， 皮克（10-12g) |
mol，摩爾 | mmol， 毫摩爾（10-3mol) |
nmol，納摩爾（10-9 mol) | μmol， 微摩爾（10-6mol) |
cm ，厘米10-2m | m， 米 |
μm ， 微米（10-6m) | mm， 納米（10-3m) |
mmHg， 毫米汞柱 | nm， 納米（10-醫(yī).學(xué)全在線9m) |
Pa，帕（1mmHg=133.3Pa) | MmH2O，毫米水柱 |
LD，致死量 | Kpa，千帕 |
MLD，最小致死量 | LD50，半數(shù)致死量 |
MED，最小有效量 | ED50，半數(shù)有數(shù)量 |
IU，iu，國(guó)際單位 | U，u，單位 |
M，克分子 | Ppm， 百萬(wàn)分之一 |
mEq， 毫克當(dāng)量 | N，當(dāng)量 |
用 藥 途 徑 符 號(hào)
id（ID)皮內(nèi)注射 | SC（iH)，皮下注射 | ip（IP)，腹腔注射 | im（IM)，肌肉注射 |
iv（IV)靜脈注射 | Iv（IVgtt)，靜脈滴注 | po（PO)，口服，經(jīng)口 | ig（IG)灌胃 |
其 他
♂，雄性 | ♀雌性 | X，均數(shù) | SD，標(biāo)準(zhǔn)差 | SE，標(biāo)準(zhǔn)誤 | ±，加或減 |
>，大于 | <，小于 | Bp，血壓 | ECG，心電圖 | OD，光亮度 | |
wt，體重 | vol，容量 | ||||
