附2： 廣州醫(yī)科大學(xué)第一臨床學(xué)院
實(shí)驗(yàn)（含診斷學(xué)、外科學(xué)總論)帶教教案
| 教研室 | 臨床免疫檢驗(yàn) | 課程 名稱 | 免疫學(xué)及檢驗(yàn) | 學(xué)時(shí) | 4 | 檢驗(yàn)專業(yè)2003 級(jí) 1、2、3班 | ||||
| 帶教時(shí)間 | 2006 年10月12 日---2006 年 10月 13 日 | 教師 姓名 | 王慧 | 職稱 | 主管技師 | |||||
| 實(shí)檢（見習(xí))項(xiàng)目 | ELISA檢測(cè)乙肝兩對(duì)半 | |||||||||
| 本次實(shí)驗(yàn) （見習(xí)) 目的、 要求 | 1．掌握ELISA法檢測(cè)“二對(duì)半”的原理、操作過程及注意事項(xiàng) 2．熟悉檢測(cè)“二對(duì)半”的臨床意義。 | |||||||||
| 內(nèi)容與安排 | 學(xué)時(shí) | |||||||||
| 一、介紹本次實(shí)驗(yàn)、見習(xí)的重點(diǎn)及安排 （實(shí)驗(yàn)課應(yīng)包括：1、實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采集，2、實(shí)驗(yàn)操作步驟， 3、實(shí)驗(yàn)操作過程注意事項(xiàng)，4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的評(píng)價(jià)及臨床意義) 1、簡(jiǎn)介什么是“二對(duì)半”，為什么不檢測(cè)HbcAg？ 2、檢測(cè)試劑盒的組成：主要介紹ELISA法的3種必備試劑，同時(shí)復(fù)習(xí)與理論相關(guān)內(nèi)容 必備試劑 ① 固相抗原或抗體------免疫吸附劑 3、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：配制洗滌液 4、加樣 5、溫育 6、洗滌 7、顯色 8、結(jié)果判斷：比色法、目測(cè)法 9、注意事項(xiàng)： 1)標(biāo)本的采取和保存：大部分ELISA 檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì)，，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染，菌體中可能含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。 抗凝不完全的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽(yáng)性，建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。 2)加樣：加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA 板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出。 3)保溫：為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，反應(yīng)板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。 4)洗滌：。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。 10、臨zxtf.net.cn床意義
10、學(xué)生分組試驗(yàn) 二、討論思考題： 1、底物A、B液成分？顯色原理？ 2、ELISA試驗(yàn)中，什么是鉤狀效應(yīng)？為什么HbsAg含量高會(huì)造成假陰性結(jié)果？ 3、ELISA試驗(yàn)中哪些因素會(huì)造成結(jié)果出現(xiàn)假陰性？哪些因素會(huì)造成結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性？ 3、ELISA檢測(cè)“乙肝二對(duì)半”臨床九種常見模式的臨床意義？ 三、小結(jié)要點(diǎn) 1、實(shí)驗(yàn)操作情況 2、注意洗滌要充分，拍板要干凈 四、布置學(xué)生作業(yè)內(nèi)容 1、書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告(包括：實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃�、器材和試劑、操作步驟、注意事項(xiàng)、、方法學(xué)評(píng)價(jià)、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、結(jié)果分析及結(jié)論、討論) 2、思考題 五、下次實(shí)驗(yàn)（見習(xí))課預(yù)習(xí)范圍及后續(xù)程介紹 下次實(shí)驗(yàn)課內(nèi)容為：循環(huán)免疫復(fù)合物的檢測(cè) 預(yù)習(xí)內(nèi)容：什么是III型變態(tài)反應(yīng)？ | 4學(xué)時(shí)zxtf.net.cn/yaoshi/ | |||||||||
| 教案制定時(shí)間： 2006 年 月 日 帶教老師簽名：王慧 | ||||||||||
| 專業(yè)主任審閱意見； 簽名： 年 月 日 | ||||||||||
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