應(yīng)用CD4和CD8單克隆抗體可將外周淋巴器官或外周血中的T細(xì)胞分為CD4+CD8-和CD4-CD8+兩個主要的亞群。每個亞群按照某些表面標(biāo)志和功能又可分為不同的功能亞群。
�。ㄒ�)CD4陽性細(xì)胞群
1.Th1和Th2亞群 應(yīng)用Th細(xì)胞克隆培養(yǎng)技術(shù)和細(xì)胞因子產(chǎn)生的不同，已發(fā)現(xiàn)小鼠CD4陽性細(xì)胞群是一個不均一的亞群，可分為Th1和Th2，主要區(qū)別見表7-6。
Th1細(xì)胞能合成IL-2、IFN-γ、，LT、IL-3、TNF-α和GM-CSF，但不能合成IL-4、IIL-5、IL-6、IL-10和IL-13；而Th2能合成TNF-α、IL-3、GM-CSF、IL-4、IL-5、IL-6、IIL-10（細(xì)胞因子合成抑制因子，CSIF)和IL-13，不能合成IL-2、IFN-γ和LT。此外Th1和Th2都能分泌三巨噬細(xì)胞炎癥蛋白和前腦啡肽原。Th1和Th2都能輔助B合成抗體，但輔助的強度和性質(zhì)不同。體外實驗表明，IL-4明顯促進B細(xì)胞合成和分泌IgE，如使LPS刺激小鼠B細(xì)胞合成IgE能力增強10-100倍。少量IFN-γ能完全陰斷IL-4對IgE合成的促進作用。Th2分泌IL-4對IgE合成有正調(diào)節(jié)作用，而Th1分泌IFN-γ則起負(fù)調(diào)節(jié)作用。此外，Th2通過分泌IL-4和IL-5輔助IgA合成，分泌IL-10（CSIF),抑制Th1細(xì)胞合成細(xì)胞因子，而Th1對IgG1合成則有抑制作用，但輔助其它幾種類型Ig的合成。由于Th1和Th2合成淋巴因子的種類不同，因而介導(dǎo)不同的超敏反應(yīng)。IL-3和IL-4均能促進肥大細(xì)胞增殖，且相互有協(xié)同作用，IL-5除輔助B細(xì)胞合成IgA外，還能刺激骨髓嗜酸性粒細(xì)胞的集落形成，因而Th2與速發(fā)型超敏反應(yīng)關(guān)系密切。Th1通過產(chǎn)生IFN-γ阻斷IgE合成，對速發(fā)型超敏反應(yīng)有抑制作用。Th1與遲發(fā)型超敏反應(yīng)有關(guān)，可能與IL-2、IFN-γ等對巨噬細(xì)胞活化和促進CTL分化作用有關(guān)，此外LT也有直接殺傷靶細(xì)胞作用。兩群Th克隆均能誘導(dǎo)抗原提呈細(xì)胞（APC)表達MHCⅡ類抗原，Th1通過IFN-γ誘導(dǎo)Mφ表達Ia抗原，而Th2通過IL-4對Mφ和B細(xì)胞Ia抗原表達起正調(diào)節(jié)作用。在人類Th1和Th2細(xì)胞亞群尚未得到最后證實。從目前發(fā)表資料來看，CD4+CD45RO+前體細(xì)胞向Th2效應(yīng)細(xì)胞分化，而IFN-γ則對前體細(xì)胞向Th2分化過程起抑制作用，因此IL-4和IFN-γ在決定CD4+CD45RO+前體細(xì)胞向Th1或Th2分化過程中起著重要的調(diào)節(jié)作用。人T細(xì)胞經(jīng)多克隆活化后，在CD4陽性細(xì)胞中IL-4mRNA陽性比便不到5%，而60%的CD4+細(xì)胞有IFN-γ和IL-2mRNA的轉(zhuǎn)錄。
表7-6 小鼠Th1和Th2亞群的比較
| Th1 | Th2 | ||
| 合成淋巴因子種類 | IL-2 | + | - |
| IFN-γ | + | - | |
| LT | + | - | |
| IL-3 | + | + | |
| TNF-α | + | + | |
| GM-CSF | + | + | |
| IL-4 | - | + | |
| IL-5 | - | + | |
| IL-6 | - | + | |
| IL-10 | - | + | |
| IL-13 | - | + | |
| 輔助B細(xì)胞 | + | ++ | |
| 輔助IgE合成 | - | + | |
| 促進肥大細(xì)胞增殖 | - | + | |
| 介導(dǎo)超敏反應(yīng)類型 | 遲發(fā)型 | 速發(fā)型 | |
| 促進Ia表達細(xì)胞 | Mφ | B，Mφ |
介導(dǎo)遲發(fā)型超敏反應(yīng)（delayed type hypersensitivity,DTH)的T細(xì)胞亞群稱為TDTH，表面標(biāo)志CD3+CD4+CD8-，可能相當(dāng)于小鼠的Th1亞群。當(dāng)曾被變應(yīng)原致敏的TDTH再次與變應(yīng)原相遇后，可釋放出多種細(xì)胞因子，參與遲發(fā)型（Ⅳ型)超敏反應(yīng)的發(fā)生。醫(yī).學(xué).全.在.線網(wǎng)站zxtf.net.cn
表7-7 TDTH釋放細(xì)胞因子參與遲發(fā)型超敏反應(yīng)
| 作用對象 | 細(xì)胞因子 | 生物學(xué)活性 |
| 巨噬細(xì)胞 | 巨噬細(xì)胞趨化因子（MCF) | 招引、聚集、活化巨噬細(xì)胞， |
| 巨噬細(xì)胞移動抑制因子（MIF) | 增強巨噬細(xì)胞吞噬和殺傷功能 | |
| 巨噬細(xì)胞活化因子（MAF) | ||
| IFN-γ | ||
| 白細(xì)胞 | 白細(xì)胞移動抑制因子（LIF) | 招引、聚集白細(xì)胞 |
| 淋巴細(xì)胞 | IL-2 | 淋巴細(xì)胞局部浸潤、增殖 |
| IFN-γ | 增強殺傷功能 | |
| 皮膚血管 | 皮膚反應(yīng)因子（SRF) | 增加血管通透性 |
| 靶細(xì)胞 | 淋巴毒素（LT) | 殺傷靶細(xì)胞 |
MCF: macrophage chemotactic factor
MIF: macrophage migration inhibition factor
MAF: macrophage activating factor
LIF: leukocyte migration inhibitory factor
SRF: skin reactive factor
LT: lymphotoxin
2.抑制細(xì)胞誘導(dǎo)亞群和輔助細(xì)胞誘導(dǎo)亞群 應(yīng)用CD45RA、CD45RO、CD29和CD31單克隆抗體可將CD4陽性細(xì)胞群分為抑制細(xì)胞誘導(dǎo)亞群和輔助細(xì)胞誘導(dǎo)亞群。兩個亞群的表面標(biāo)志和功能比較見表7-8。
（1)CD31：最近發(fā)現(xiàn)CD31是一種新的、激活后表達水平不發(fā)生明顯變化的抑制細(xì)胞誘導(dǎo)亞群的表面標(biāo)記。CD31是一種血小板-內(nèi)皮細(xì)胞胞粘附分子（PECAM,gpⅡa)，分子量為140kDa，其結(jié)構(gòu)屬于免疫球蛋白超家族成員。從外周血新鮮分離的CD4細(xì)胞中，CD31McAb主要與CD45RA亞群反應(yīng)，對B細(xì)胞合成IgG輔助作用不明顯，對ConA和自身MHC（自身MLR)反應(yīng)較為敏感；而CD31-的CD4細(xì)胞群中，發(fā)現(xiàn)有大量輔助B細(xì)胞合成IgG的活性和對某些抗原刺激的回憶反應(yīng)。CD45RA+的CD4細(xì)胞大激活后，盡管細(xì)胞表面丟失CD45RA，但表面CD31的表達仍不發(fā)生明顯變化；而CD45RO+CD45RA-的CD4細(xì)胞激活后不能獲得CD31表達。由于CD31在CD4細(xì)胞激活后仍不變化，對于鑒別抑制細(xì)胞誘導(dǎo)亞群和輔助細(xì)胞誘導(dǎo)亞群是一種有用的標(biāo)志。
迄今為止，許多粘附分子如 CD11a/CD18(LFA-1),LFA-3,CD2和CD29（VLAβ鏈)主要表達在CD45RO+T細(xì)胞表面。而CD31則表達在CD45RA+CD4細(xì)胞表面�？笴D31McAb作用于naive T細(xì)胞能觸發(fā)其VLA-4介導(dǎo)的粘附作用。內(nèi)皮細(xì)胞表面CD31及其配體與T細(xì)胞表面CD31及其配體相互作用很可能觸發(fā)整合素介導(dǎo)的粘附作用。CD31如何參與CD45RA+CD4+T細(xì)胞功能以及誘導(dǎo)抑制性T細(xì)胞產(chǎn)生還有待進一步研究。
