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  第二節(jié) 比色分析測量儀器和測量方法           ★★★ 【字體:

比色分析測量儀器和測量方法(比色分析,吸光光度法,比色測量儀器)

來源:醫(yī)學(xué)全在線 更新:2007-8-31 醫(yī)學(xué)論壇
( 關(guān)鍵詞:比色分析,吸光光度法,比色測量儀器,光電比色計,721型分光光度計,標(biāo)準(zhǔn)曲線,標(biāo)準(zhǔn)曲線法,直接比較計算法 )

比色分析法通過比較溶液對光的吸收程度以測定物質(zhì)的含量。

  一、比色測量儀器

 。ㄒ唬┍壬珳y量儀器的基本部件

  比色測量儀器一般包括以下五大部件(圖8-4)。

圖8-4 比色測量儀器部件示意圖

  1.光源

  在光電比色計和可見光分光光度計中,采用6~12V的鎢燈,其最適宜的波長范圍是360~1000nm,為使光的強(qiáng)度穩(wěn)定,須用穩(wěn)壓裝置來穩(wěn)定電壓。

  2.波長控制器

  在光電比色計中采用濾光片作為波長控制器。濾光片是有色玻璃片,其作用是從光源發(fā)出的連續(xù)光譜中分出實驗所需的某一特定波長范圍的光,即獲得適當(dāng)波長的近似單色光。

  選擇濾光片的原則是濾光片最易透過的光,也就是溶液最易吸收的光。即濾光片的顏色與溶液的顏色應(yīng)互為補(bǔ)色,這是因為有色溶液對它的互補(bǔ)色光有最大的吸收。581-G型光電比色計通常只有紅、綠和藍(lán)三塊濾光片。例如,要測定KMnO4溶液,就應(yīng)選用綠色濾光片。

  分光光度計采用單色器來控制波長。它可以把連續(xù)波長的光分解,從中得出任一所需波長的更純的單色光。單色器包含有狹縫調(diào)節(jié)、透鏡系統(tǒng)以及色散元件。

  圖8-5為自準(zhǔn)式單色光器。光源發(fā)出的光經(jīng)入射狹縫由凹面準(zhǔn)直鏡反射后的平行光投在棱鏡上,經(jīng)棱鏡色散后的光又經(jīng)準(zhǔn)直鏡反射到出射狹縫,轉(zhuǎn)動棱鏡便可在出射狹縫得到所需波長的單色光。

 

圖8-5 自準(zhǔn)式單色光器示意圖 

圖8-6 硒光電效應(yīng)示意圖

  3.吸收池

  吸收池供比色時盛溶液用,它是用無色透明、厚度均勻的玻璃制成的。其透光的兩面嚴(yán)格平行。同一系列的測定中,所用的比色皿必須配套,即同一配套比色皿盛有同一溶液在同一波長時測得的透光率誤差不得越過0.5%。實驗時可根據(jù)溶液的濃度不同選擇。0.5,1.0,2.0,3.0cm不同規(guī)格的比色皿。比色皿要保持清潔,透光面要注意保護(hù),不得用手直接接觸或用粗糙的濾紙擦拭,以免劃傷表面,影響吸收程度。若外壁有液珠,應(yīng)用濾紙吸干后再用擦鏡紙擦凈。

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